qpcr原理及应用(qpcr原理及应用)
大家好,今天小六子来为大家解答以下的问题,关于qpcr原理及应用,qpcr原理及应用这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、qpcr原理是在PCR扩增过程中,通过荧光信号,对PCR进程进行实时检测。
2、由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以成为定量的依据。
3、因而发达国家在相关方法和仪器方面的研发非常快,成为分子生物学诊断的主流。
4、应用行业:各级各类医疗机构、大学及研究所、CDC、检验检疫局、兽医站、食品企业及乳品厂等。
5、由于qPCR是实时定量检测致病病原体基因核酸,因此它比化学发光、时间分辨、蛋白芯片等免疫学方法更具独到优势。
6、扩展资料实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限,实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度,并记录在电脑软件之中,通过对每个样品Ct值的计算,根据标准曲线获得定量结果。
7、因此,实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的:1)Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时,刚刚进入真正的指数扩增期(对数期),此时微小误差尚未放大,因此Ct值的重现性极好,即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增,得到的Ct值是恒定的。
8、2)Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系,可利用标准曲线对未知样品进行定量测定,因此,实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。
9、外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。
10、利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确,重现性最好的定量方法,已得到全世界的公认,广泛用于基因表达研究、转基因研究,药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
11、参考资料来源:百度百科-QPCR。
本文分享完毕,希望对你有所帮助。